一般推荐MO+CRISPRi两种策略去同时敲降一个基因,由于MO是在转录后水平上敲降基因的功能,而CRISPRi是在转录水平上敲降基因的功能,使用两种独立的、原理完全不同的敲降方法,如果给出的敲降效果(表型)是一样的,那么这样建立的敲降方法可以被认可是有效且特异的。请大家注意:评价基因敲降效果需要从有效和特异两个方面来考虑。有效性问题:CRISPRi敲降的有效性可以通过RT-PCR法检测目标基因表
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以基因编辑Crispr/Cas9工具构建斑马鱼敲除/敲入模型
Crispr/Cas9技术简单、高效,且没有物种限制,现已广泛应用于人、大小鼠、斑马鱼、果蝇、猪、羊、水稻、小麦等动植物,为动植物品种改良、疾病模型建立以及基因治疗等不同领域开展基础研究与应用研究的遗传工程利器。
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