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斑马鱼基因敲降思路

斑马鱼基因敲降思路

基因敲降项目的一般工作思路：1）首先分析目标基因在斑马鱼胚胎发育早期是否有表达（如果没有表达，则根本不存在敲降问题）。2）设计并安排实验（RT-PCR）检测目标基因在胚胎发育早期的表达情况（目的在于确认目标基因在胚胎发育早期有表达，同时在有表达的情况下建立检测目标基因表达下调的检测方法）。实际上，即使数据库中有描述该基因在胚胎发育早期有表达，也要开展此项实验。3）在确认该基因在胚胎发育早期有表达的

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斑马鱼敲降CRISPRi法与MO（吗啡啉）法比较

斑马鱼敲降CRISPRi法与MO（吗啡啉）法比较

一、基因敲降的前期准备工作相同1.1 生物信息学分析目标基因在斑马鱼早期胚胎发送过程中是否有表达。1.2 收集斑马鱼早期发育胚胎（通常为48 hpf 前的胚胎），提取总RNA，然后进行体外转录（RT）。1.3 设计检测目标基因表达的PCR 引物，以1.2获得的cDNA 为模板，进行PCR 扩增，确认目标基因在早期有表达。二、MO法与CRISPRi法的敲降原理不同2.1 MO 是在转录后水平上敲降基

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斑马鱼敲降CRISPRi法与MO（吗啡啉）法比较

斑马鱼敲降CRISPRi法与MO（吗啡啉）法比较

一、基因敲降的前期准备工作相同1.1 生物信息学分析目标基因在斑马鱼早期胚胎发送过程中是否有表达。1.2 收集斑马鱼早期发育胚胎（通常为48 hpf 前的胚胎），提取总RNA，然后进行体外转录（RT）。1.3 设计检测目标基因表达的PCR 引物，以1.2获得的cDNA 为模板，进行PCR 扩增，确认目标基因在早期有表达。二、MO法与CRISPRi法的敲降原理不同2.1 MO 是在转录后水平上敲降基

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