科研服务
SCIENTIFIC SERVICE
基因敲除细胞系的建立
1.服务信息
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流程分布 |
周期工作日 |
提交内容 |
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CRISPR设计 |
2 |
专业设计报告 |
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客户确认 |
1-2 |
客户回复 |
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引物合成 |
2 |
获得引物 |
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质粒构建，引物测试及目标基因扩增 |
6 |
阶段报告 |
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质粒转染细胞 |
6-8 |
阶段报告（提供荧光照片） |
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活性验证 |
7-10 |
阶段报告 |
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获得单克隆细胞 |
35 |
获得30个细胞株 |
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单细胞株突变体鉴定 |
10 |
总结报告 |
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总周期：3-3.5月 |
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2.基因组编辑动物细胞系建系流程图：
3.服务流程
案例展示
案例说明
Ｘ建立基因组编辑细胞系的优选策略之多个sgRNA同时使用以高效实现目标基因的靶向突变：
虽然有报道利用一对sgRNA，可以删除长至200 kb的基因组DNA片段，但是删除100-200 bp相较而言更容易实现，更为重要的同时使用多个sgRNA，可显著提高基因组靶向突变的成功率，如果实现删除则有利于后面筛选时的基因型鉴定。
在哺乳动物的基因组编辑中，一般建议同时使用(测试)3个sgRNA
以提高工作效率
参考文献
参考文献
Ｘ参考文献
