sgRNA的骨架序列并不与crispr（基因组上的特定DNA序列）结合，识别crispr序列的是102 nt （20+82 nt）sgRNA中的前20 nt（gRNA序列），通过gRNA与crispr序列的互补识别，sgRNA引导Cas9靶向切割crsipr中3'侧（靠近PAM即NGG）的3至4 nt间的3‘-5’磷酸二酯键，形成双链断裂（DSB）。sgRNA的骨架序列并不与crispr（基因组上的特定DNA序列）结合，识别crispr序列的是102 nt （20+82 nt）sgRNA中的前20 nt（gRNA序列），通过gRNA与crispr序列的互补识别，sgRNA引导Cas9靶向切割crsipr中3'侧（靠近PAM即NGG）的3至4 nt间的3‘-5’磷酸二酯键，形成双链断裂（DSB）。